クイーンスライムはハードモードのボスであり、主に
ハロウィン（Hallow）で召喚される大型のスライム型敵である。キングスライムの上位に相当する存在で、第二形態では翼を生やして空中戦を行う。最大体力は9000で、ダメージを受けると小型のスライム従者を召喚する特徴を持つ。
移動と攻撃はジャンプを繰り返しながら行われ、接近できないと地中に潜って近くへテレポートする。通常形態では結晶にエネルギーを溜めて重力の影響を受け跳ね返る飛翔体を6方向に発射する攻撃や、プレイヤーの真上を通り抜けて地面に叩きつけ衝撃波を発生させる地面攻撃を行う。体力が50%以下になると翼を展開して飛行し、飛行中は10方向に広がるRegal Gel弾を放つほか、高速でプレイヤー上空に移動してストンプ（着地衝撃波）を仕掛ける。液体はボス本体とRegal Gelの速度を低下させ、第二形態では踏みつけ時のみ液体の影響を受ける。
被弾時に召喚される従者は3種あり、
クリスタルスライム（結晶
スパイクを垂直軌道で発射）、バウンシースライム（跳ねるピンクのゲル弾を発射）、
スライマー（接触ダメージを与える追尾）をランダムで出す。従者は液体上では攻撃しない。
戦術面では従者処理が重要で、ダート武器＋
クリスタルダーツや召喚／遠距離で雑魚を速やかに削る手段が有効である。空中に留まれる羽やマウントを活用すると第一形態では安全に戦えるが、第二形態では地上付近に留まって隙をつくるのが有利である。プラット
フォームを分断して従者を落とす、溶岩を利用して従者を処理する、複数のデバフを同時に与えて小型スライムを素早く殲滅するなどが有効。昼間に戦うと弾が見やすく、ライフ回復効果のある装備や回復支援が役立つ。クイーン専用の宝箱（トレジャーバッグ）はデベロッパーアイテムを含まない点に注意する。
