Sauerstoff ist ein leichtes, atembares Gas, das Duplicants zum Überleben benötigen. Es steigt über schwerere Gase wie Kohlendioxid, und Duplicants können es nur innerhalb eines nutzbaren Druckbereichs atmen: Unter 50 g/Feld ist es nicht atembar, während es zwischen 50 und 300 g/Feld zwar atembar ist, Duplicants aber dennoch stresst. Ein typischer Duplicant verbraucht 100 g/s, wobei mehrere Eigenschaften diesen Bedarf senken oder erhöhen. Wenn ein Duplicant nicht atmen kann, hält er die Luft an, hört auf zu arbeiten und läuft zu Sauerstoff; wenn die Atemanzeige leer wird, erstickt er.
Sauerstoff ist eine der wichtigsten Ressourcen im frühen und mittleren Spiel, weil viele Systeme direkt davon abhängen. Atmo Suits, Jet Suits, Oxygen Masks und Bleianzug-Dock benötigen alle Sauerstoff, um ihre Anzüge wieder aufzufüllen, und Teleskop benötigt ebenfalls Sauerstoff, um zu funktionieren. Es wird außerdem in Oxilit-Raffinerie verwendet, das Sauerstoff und Gold mit einer Rate von 600 g/s Sauerstoff und 3 g/s Gold in 600 g/s Oxilit umwandelt. In der Critter-Wirtschaft können Puft Princes und Dense Pufts Oxygen atmen und Oxilit ausscheiden, während Longhair Slicksters große Mengen davon verbrauchen und mobile Dekoration bereitstellen.
Es gibt viele Möglichkeiten, Sauerstoff zu produzieren. Zu den häufigsten gehören Sauerstoff-Diffusor aus Alge, Elektrolyseur aus Wasser, Algen-Terrarium aus Wasser und Alge, Oxifarn aus Kohlendioxid sowie Rost-Desoxidierer aus Rost und Salz. Der Deodorizer wandelt außerdem Verschmutzter Sauerstoff mithilfe von Sand oder Regolith in Sauerstoff um. Natürliches Oxilit gibt Sauerstoff ab, und eine Ansammlung nahe dem Biodrucker verschafft in den ersten paar Zyklen anfangs etwas Luft zum Atmen. Sauerstoff kann außerdem von einigen erneuerbaren Weltraum-POIs in fester oder gasförmiger Form gewonnen werden.
Sauerstoff kann auch in spezielleren Anwendungen nützlich sein. Wird es zu Flüssiger Sauerstoff gekühlt, wird es zu einem starken Raketenoxidator für Petroleum-Triebwerk und Wasserstoff-Triebwerk. Es ist nicht das beste Medium für schnelle Wärmeübertragung, aber für langsame Wärmeaustauschkreisläufe praktisch, weil es sich gefahrlos mit umgebendem Sauerstoff mischen kann, wenn die Rohrleitungen für Wartungsarbeiten geöffnet werden. Dadurch ist es einfacher zu handhaben als viele andere Gase. In solchen Fällen sind Radiant-Rohrleitungen an Wärmequelle und Wärmesenke der übliche Aufbau.
Sauerstoff wird für Basisinfrastruktur oft bevorzugt, weil es reichlich vorhanden und leicht zu verlegen ist.
Sauerstoff in einem Kreislauf zu verwenden, ist bei Wartungsarbeiten praktisch, da ausgetretenes Gas sich einfach mit dem umgebenden Sauerstoff vermischt.
Flüssiger Sauerstoff ist die relevante Endgame-Form, wenn Lagerung für leistungsstarken Raketenoxidator benötigt wird.
Der größte Nachteil ist, dass die Sauerstoff-Produktion mit dem Bedarf der Duplicants Schritt halten muss, besonders wenn die Kolonie wächst.
